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菌落計(jì)數(shù)方法的具體操作步驟及注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2024-09-29      瀏覽次數(shù):17569
      現(xiàn)今,對(duì)菌落的研究越來越多,研究菌落的方法也越來越多,下面我們來具體說說菌落計(jì)數(shù)方法。菌落計(jì)數(shù)方法是將待測樣品適當(dāng)稀釋后,取一定量的稀釋液涂布到平板上,每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個(gè)單菌落代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞,即菌落形成單位(colony-forming units,CUF)。該方法是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的,菌液中的死亡細(xì)菌或無繁殖能力的細(xì)菌不包括在內(nèi)。

菌落計(jì)數(shù)方法操作方法如下:
1、取一定量(如100μl)的菌懸液,進(jìn)行10×倍梯度系列稀釋;
2、取一定量(如100μl)稀釋液均勻涂布于平板培養(yǎng)基,每個(gè)稀釋度至少涂3個(gè)平板;
3、根據(jù)待計(jì)數(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)特性,將涂好的平板放置于適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行培養(yǎng);
4、待平板上長出菌落后,選取稀釋度合適的平板(通常菌落數(shù)為數(shù)十至數(shù)百個(gè)之間),數(shù)平板上的菌落數(shù),根據(jù)稀釋度和涂平板的液體量,換算出原始菌液中的活菌數(shù)。通常單位是CUF/ml,即每ml原始菌液中有多少個(gè)活菌數(shù)。
菌落計(jì)數(shù)方法的注意事項(xiàng):
1、一般選擇每個(gè)平板上長有30-300個(gè)菌落的稀釋度計(jì)算每毫升的含菌量較為合適。
2、同一稀釋度的三個(gè)重復(fù)對(duì)照的菌落數(shù)不應(yīng)相差很大,否則表示試驗(yàn)不。
3、為了減少誤差,同一稀釋度重復(fù)對(duì)照平板建議不要少于3個(gè)。
4、計(jì)數(shù)稀釋度平板的菌落數(shù)與上下相鄰稀釋度平板的菌落數(shù)基本呈10倍量關(guān)系,否則表示稀釋度不準(zhǔn)確。
以上就是菌落計(jì)數(shù)方法的操作步驟及注意事項(xiàng),希望對(duì)大家有所幫助。
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