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抑菌圈測量儀觀察出現抑菌圈破裂的調整方式

更新時間:2019-01-29      瀏覽次數:3014
 抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式,主要用于測定殺菌防霉劑對細菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。抑菌圈測量儀測量是微生物分析的經典方法。它是利用抑菌物質在涂布特定試驗菌的瓊脂培養(yǎng)基內成球形立體狀擴散,抑制試驗菌的繁殖,在抑菌物質的周圍形成透明圈,即抑菌圈。在抑菌圈測量儀試驗過程中,抑菌圈出現破裂或呈卵圓形、橢圓形等不正常形狀時,可以從以下幾個方面進行分析和調整:
1.鋼管兩端面不夠平,使抗生素漏出,破壞了均勻擴散現象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時工作臺不水平,可造成基層厚度不均勻,因此應選擇加工相同的鋼管,兩端面不同的切勿混用;挑選底平的雙碟,調整工作臺的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被抗生素液污染,會使抑菌圈破裂,有時甚至使試驗菌被抑制,因此,在整個試驗中要嚴格防止抗生素污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時,培養(yǎng)基溫度過高或受熱時間過長,可造成試驗菌部分被殺死或全部被殺死,使抑菌圈破裂甚至無菌??刂品椒ㄊ歉鶕N要求不同,將培養(yǎng)基均勻降溫,溫度平衡后,再加入試驗菌。
4.在滴加抗生素溶液至鋼管內時,毛細滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面,不易覺察,影響抑菌圈,因此滴加溶液時毛細滴管內不得有氣泡,避免管口太細,毛細滴管距離鋼管口不應太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時,會形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調整抑菌圈的直徑可解決此問題。如:增加菌層培養(yǎng)基內的試驗菌量;降低抗生素溶液的濃度;調整稀釋抗生素用的緩沖液的PH值或鹽濃度;調整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過程中,溫度不均勻,雙碟上細菌生長速度不一致,造成抑菌圈小或不圓,影響抗生素在瓊脂培養(yǎng)基內的擴散系數。因此在細菌培養(yǎng)過程中應使用水浴恒溫培養(yǎng)箱,保證受熱均勻。
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